比較兩種不同低溫保護劑對皮膚組織橋粒芯糖蛋白1(desmoglein 1,Dsg1)低溫保存后表達的影響,為尋求皮膚組織低溫保護劑的優良配方提供實驗依據。 方法 取燒傷患者整形術后自愿捐獻所余大腿部刃厚皮片5 塊,于取皮后4 h 內進行實驗。根據冷凍時添加保存劑不同,將皮片分為3 組。A 組(n=2):0.5 mol/L 的海藻糖 /DMSO;B 組(n=2):傳統低溫保護劑DMSO/ 丙二醇;置于 — 196℃液氮中分別儲存7、21 d 后復溫取材進行實驗;C 組(n=1):新鮮刃厚皮片,不作任何保護劑處理。對各組皮片行免疫組織化學染色觀察,RT-PCR 方法檢測皮片Dsg1 基因水平。 結果 免疫組織化學染色見儲存7 d 后,A、B 組Dsg 1 蛋白染色均呈棕黃色,分布較均勻,表皮基底細胞表達信號與C 組相似;A、B 組吸光度(A)值分別為0.285 ± 0.006、0.284 ± 0.004;與C 組0.287 ± 0.008 比較差異無統計學意義(P gt; 0.05)。儲存21 d 后,A 組陽性細胞表達無明顯減弱,B 組強度減弱;A、B 組A 值分別為0.282 ± 0.004、0.275 ± 0.005,B組與A、C 組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。RT-PCR 檢測示C 組、儲存7 d A、B 組及儲存21 d A、B 組Dsg 1 基因表達A 值分別為0.814 ± 0.012、0.810 ± 0.012、0.803 ± 0.008、0.806 ± 0.008 及0.782 ± 0.013。儲存后21 d B 組和A、C 組比較差異有統計學意義(P lt; 0.05),余時間點組間比較差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。 結論 海藻糖與DMSO 聯合應用對皮膚組織Dsg1 的保護作用優于DMSO/ 丙二醇。
引用本文: 賈曉明,李東杰,馬彩虹. 不同低溫保護劑對皮膚組織橋粒芯糖蛋白1表達影響的比較. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(6): 704-707. doi: 復制
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