骨髓間充質干細胞治療慢性后肢缺血機理的初步研究△_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

楊盛家 ¹ ,  陳兵 ¹ , 佟鑄 ¹ , 張淑文 ² , 史小林 ³ , 許晴 ³ , 張斌 ¹ , 張建 ¹

1.首都醫科大學宣武醫院血管外科（北京 100034）;;
2.首都醫科大學宣武醫院再生醫學實驗室（北京 100034）;;
3.首都醫科大學解剖組織與胚胎教研室（北京 100034）;

關鍵詞：

骨髓間充質干細胞慢性后肢缺血機理線拴法大鼠

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目的　利用細胞示蹤技術探討骨髓間充質干細胞（MSCs）治療慢性后肢缺血的相關機理。
方法　采用密度梯度離心法結合直接貼壁法分離和培養大鼠MSCs，并以5-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）標記。采用線栓法制備8只Lewis大鼠慢性后肢缺血模型，將其隨機均分為MSCs移植組和對照組，分別于患側后肢肌肉注射MSCs和生理鹽水。分別于移植術后第7天和第14天，對其進行臨床觀察、后肢血流量測定及后肢血管造影，再于相應時間點處死大鼠，取患側后肢股四頭肌和腓腸肌，行HE染色及BrdU免疫組化染色。
結果　移植術后14d，8只大鼠全部成活，移植部位均無壞死和腫瘤形成；MSCs移植組大鼠患側/健側后肢的血流灌注比值明顯增高（1.773比1.279），而血管造影結果提示2組大鼠的側支血管數量比值未見顯著增加（0.908比0.835）。HE染色結果示2組大鼠的股四頭肌及腓腸肌并未發生特殊的病理學變化。BrdU免疫組化結果顯示，陽性顆粒定位為股四頭肌及腓腸肌的間質細胞和血管內皮細胞；且MSCs的分布存在差異，移植術后7d腓腸肌內陽性細胞所占比例明顯高于股四頭肌，而14d時則相反。
結論　MSCs移植在術后早期可以提高血流灌注量，但這并非為增加了側支血管數量使然，MSCs移植后所引起的旁分泌效應可能在術后早期起著重要的作用。

引用本文： 楊盛家,陳兵,佟鑄,張淑文,史小林,許晴,張斌,張建. 骨髓間充質干細胞治療慢性后肢缺血機理的初步研究△. 中國普外基礎與臨床雜志, 2013, 20(6): 608-614. doi: 復制

1.	劉程偉，田浩，么榮榮，等. 神經生長因子促大鼠缺血后肢血管再生的實驗研究[J]. 黑龍江醫藥科學， 2012， 35(1)：1-2.
2.	吳春朋，張潛，方寧，等. 骨髓間充質干細胞移植促進糖尿病大鼠后肢缺血血管的新生[J]. 中國組織工程研究， 2012， 16(1)：76-80.
3.	胡朝昶，哈小琴，何玉梅，等. 股動脈周圍骨骼肌多點注射攜帶肝細胞生長因子基因重組質粒糖尿病大鼠肢體缺血骨骼肌的組織學變化[J]. 中國組織工程研究， 2012， 16(15)：2724-2727.
4.	谷涌泉，張建，齊立行，等. 不同移植濃度自體骨髓干細胞治療下肢缺血臨床療效的影響[J]. 中國修復重建外科雜志， 2006， 20(5)：504-506.
5.	谷涌泉，郭連瑞，張建，等. 自體骨髓干細胞移植治療嚴重下肢缺血1例[J]. 中國實用外科雜志， 2003， 23(11)：670.
6.	Fadini GP， Avogaro A. Autologous transplantation of granulocyte colony-stimulating factor-mobilized peripheral blood mononuclear cells improves critical limb ischemia in diabetes[J]. Diabetes Care， 2006， 29(2)：478-479.
7.	楊盛家，陳兵，羅濤，等. Lewis大鼠慢性后肢缺血模型的制備與評價[J]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2012， 19(12)：1291-1297.
8.	盧英豪，王季石，孫志強，等. 外周血造血干細胞移植治療血液病51例療效觀察[J]. 腫瘤， 2010， 30(9)：791-794.
9.	吳漢新，李建勇，錢思軒，等. 異基因造血干細胞移植治療血液病12例臨床分析[J]. 南京醫科大學學報：自然科學版， 2004， 24(4)：413-415.
10.	劉濤，邵增務，李健，等. 脊髓損傷傳統治療及細胞移植基因治療的進展[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2007， 11(28)：5598-5601.
11.	劉會蘭，孫自敏. 耿良權，等. 親緣HLA不全相合造血干細胞移植治療血液病11例[J]. 中國實用內科雜志， 2007， 27(增刊 1)：132-133.
12.	張明偉，于曉妉，郭子寬，等. 體外長期培養對人骨髓間充質干細胞生物學特性的影響[J]. 組織工程與重建外科雜志， 2005， 1(1)：51-53.
13.	楊麗，張榮華，謝厚杰，等. 建立大鼠骨髓間充質干細胞穩定分離培養體系與鑒定[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2009， 13(6)：1064-1068.
14.	李曉峰，趙勁民，蘇偉，等. 大鼠骨髓間充質干細胞的培養與鑒定[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2011， 15(10)：1721-1725.
15.	Kalka C， Masuda H， Takahashi T， et al. Transplantation of ex vivo expanded endothelial progenitor cells for therapeutic neovascularization[J]. Proc Natl Acad Sci U S A， 2000， 97(7)：3422-3427.
16.	Orlic D， Kajstura J， Chimenti S， et al. Transplanted adult bone marrow cells repair myocardial infarcts in mice[J]. Ann N Y Acad Sci， 2001， 938：221-229.
17.	Kocher AA， Schuster MD， Szabolcs MJ， et al. Neovascularization of ischemic myocardium by human bone-marrow-derived ang-ioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis， reduces remodeling and improves cardiac function[J]. Nat Med， 2001， 7(4)：430-436.
18.	Shintani S， Murohara T， Ikeda H， et al. Augmentation of postnatal neovascularization with autologous bone marrow transplantation[J]. Circulation， 2001， 103(6)：897-903.
19.	Fuchs S， Baffour R， Zhou YF， et al. Transendocardial delivery of autologous bone marrow enhances collateral perfusion and regional function in pigs with chronic experimental myocardial ischemia[J]. J Am Coll Cardiol， 2001， 37(6)：1726-1732.
20.	Tateishi-Yuyama E， Matsubara H， Murohara T， et al. Therapeuticangiogenesis for patients with limb ischaemia by autologous transplantation of bone-marrow cells：a pilot study and a randomised controlled trial[J]. Lancet， 2002， 360(9331)：427-435.
21.	Hamano K， Li TS， Kobayashi T， et al. The induction of angiog-enesis by the implantation of autologous bone marrow cells：a novel and simple therapeutic method[J]. Surgery， 2001， 130(1)：44-54.
22.	Galiano RD， Tepper OM， Pelo CR， et al. Topical vascular endo-thelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells[J]. Am J Pathol， 2004， 164(6)：1935-1947.
23.	Beck H， Voswinckel R， Wagner S， et al. Participation of bone marrow-derived cells in long-term repair processes after experimental stroke[J]. J Cereb Blood Flow Metab， 2003， 23(6)：709-717.
24.	Silva WA Jr， Covas DT， Panepucci RA， et al. The profile of gene expression of human marrow mesenchymal stem cells[J]. Stem Cells， 2003， 21(6)：661-669.
25.	Deindl E， Ziegelhöffer T， Kanse SM， et al. Receptor-independent role of the urokinase-type plasminogen activator during arteriogenesis[J]. FASEB J， 2003， 17(9)：1174-1176.
26.	王小蕊，侯相麟，席亞明，等. 成人骨髓間充質干細胞的鑒定與體外BrdU標記[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2008， 12(21)：4131-4135.
27.	張本斯，李莊，楊新文，等. BrdU標記骨髓間充質干細胞的研究[J]. 大理學院學報， 2007， 6(2)：23-26.

1. 劉程偉，田浩，么榮榮，等. 神經生長因子促大鼠缺血后肢血管再生的實驗研究[J]. 黑龍江醫藥科學， 2012， 35(1)：1-2.
2. 吳春朋，張潛，方寧，等. 骨髓間充質干細胞移植促進糖尿病大鼠后肢缺血血管的新生[J]. 中國組織工程研究， 2012， 16(1)：76-80.
3. 胡朝昶，哈小琴，何玉梅，等. 股動脈周圍骨骼肌多點注射攜帶肝細胞生長因子基因重組質粒糖尿病大鼠肢體缺血骨骼肌的組織學變化[J]. 中國組織工程研究， 2012， 16(15)：2724-2727.
4. 谷涌泉，張建，齊立行，等. 不同移植濃度自體骨髓干細胞治療下肢缺血臨床療效的影響[J]. 中國修復重建外科雜志， 2006， 20(5)：504-506.
5. 谷涌泉，郭連瑞，張建，等. 自體骨髓干細胞移植治療嚴重下肢缺血1例[J]. 中國實用外科雜志， 2003， 23(11)：670.
6. Fadini GP， Avogaro A. Autologous transplantation of granulocyte colony-stimulating factor-mobilized peripheral blood mononuclear cells improves critical limb ischemia in diabetes[J]. Diabetes Care， 2006， 29(2)：478-479.
7. 楊盛家，陳兵，羅濤，等. Lewis大鼠慢性后肢缺血模型的制備與評價[J]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2012， 19(12)：1291-1297.
8. 盧英豪，王季石，孫志強，等. 外周血造血干細胞移植治療血液病51例療效觀察[J]. 腫瘤， 2010， 30(9)：791-794.
9. 吳漢新，李建勇，錢思軒，等. 異基因造血干細胞移植治療血液病12例臨床分析[J]. 南京醫科大學學報：自然科學版， 2004， 24(4)：413-415.
10. 劉濤，邵增務，李健，等. 脊髓損傷傳統治療及細胞移植基因治療的進展[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2007， 11(28)：5598-5601.
11. 劉會蘭，孫自敏. 耿良權，等. 親緣HLA不全相合造血干細胞移植治療血液病11例[J]. 中國實用內科雜志， 2007， 27(增刊 1)：132-133.
12. 張明偉，于曉妉，郭子寬，等. 體外長期培養對人骨髓間充質干細胞生物學特性的影響[J]. 組織工程與重建外科雜志， 2005， 1(1)：51-53.
13. 楊麗，張榮華，謝厚杰，等. 建立大鼠骨髓間充質干細胞穩定分離培養體系與鑒定[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2009， 13(6)：1064-1068.
14. 李曉峰，趙勁民，蘇偉，等. 大鼠骨髓間充質干細胞的培養與鑒定[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2011， 15(10)：1721-1725.
15. Kalka C， Masuda H， Takahashi T， et al. Transplantation of ex vivo expanded endothelial progenitor cells for therapeutic neovascularization[J]. Proc Natl Acad Sci U S A， 2000， 97(7)：3422-3427.
16. Orlic D， Kajstura J， Chimenti S， et al. Transplanted adult bone marrow cells repair myocardial infarcts in mice[J]. Ann N Y Acad Sci， 2001， 938：221-229.
17. Kocher AA， Schuster MD， Szabolcs MJ， et al. Neovascularization of ischemic myocardium by human bone-marrow-derived ang-ioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis， reduces remodeling and improves cardiac function[J]. Nat Med， 2001， 7(4)：430-436.
18. Shintani S， Murohara T， Ikeda H， et al. Augmentation of postnatal neovascularization with autologous bone marrow transplantation[J]. Circulation， 2001， 103(6)：897-903.
19. Fuchs S， Baffour R， Zhou YF， et al. Transendocardial delivery of autologous bone marrow enhances collateral perfusion and regional function in pigs with chronic experimental myocardial ischemia[J]. J Am Coll Cardiol， 2001， 37(6)：1726-1732.
20. Tateishi-Yuyama E， Matsubara H， Murohara T， et al. Therapeuticangiogenesis for patients with limb ischaemia by autologous transplantation of bone-marrow cells：a pilot study and a randomised controlled trial[J]. Lancet， 2002， 360(9331)：427-435.
21. Hamano K， Li TS， Kobayashi T， et al. The induction of angiog-enesis by the implantation of autologous bone marrow cells：a novel and simple therapeutic method[J]. Surgery， 2001， 130(1)：44-54.
22. Galiano RD， Tepper OM， Pelo CR， et al. Topical vascular endo-thelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells[J]. Am J Pathol， 2004， 164(6)：1935-1947.
23. Beck H， Voswinckel R， Wagner S， et al. Participation of bone marrow-derived cells in long-term repair processes after experimental stroke[J]. J Cereb Blood Flow Metab， 2003， 23(6)：709-717.
24. Silva WA Jr， Covas DT， Panepucci RA， et al. The profile of gene expression of human marrow mesenchymal stem cells[J]. Stem Cells， 2003， 21(6)：661-669.
25. Deindl E， Ziegelhöffer T， Kanse SM， et al. Receptor-independent role of the urokinase-type plasminogen activator during arteriogenesis[J]. FASEB J， 2003， 17(9)：1174-1176.
26. 王小蕊，侯相麟，席亞明，等. 成人骨髓間充質干細胞的鑒定與體外BrdU標記[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2008， 12(21)：4131-4135.
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