比較海藻糖與傳統低溫保護劑對皮膚組織α- 輔肌動蛋白(α-actinin)低溫保存后表達的影響,進一步揭示海藻糖的低溫抗凍機制。 方法 實驗共進行6 次,每次取自愿捐獻燒傷患者整形術后所余大腿部刃厚皮片5 塊,根據凍存時添加保存液不同,將皮片隨機分為5 組,每組各1 塊。T/D 組:添加0.5 mol/L 海藻糖/DMSO,完全浸沒皮片;D/P 組:DMSO/ 丙二醇;D/K 組:DMSO/ 無血清角質細胞培養基;DMEM 組:DMEM;置于- 196℃液氮中儲存14 d 后復溫進行實驗;對照組:刃厚皮片不作任何處理。對各組皮片進行免疫組織化學染色觀察,RT-PCR 方法檢測皮片α-actinin 基因水平,皮膚內琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase,SDH)定量測定法檢測皮膚活力。 結果 對照組、T/ D 組、D/P 組、D/K 組及DMEM 組吸光度(A)值分別為27.50 ± 7.92、18.40 ± 5.81、13.10 ± 5.11、11.50 ± 4.54 及5.30 ±2.14。對照組與T/D 組比較差異無統計學意義(P gt; 0.05),與其他組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。RT-PCR 檢測對照組、T/D 組、D/P 組、D/K 組及DMEM 組α-actinin 基因表達A 值分別為0.816 ± 0.134、0.723 ± 0.245、0.564 ± 0.265、0.245 ± 0.071 及0.148 ± 0.048。對照組與T/D、D/P 組比較,差異無統計學意義(P gt; 0.05);與D/K、DMEM 組比較,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。對照組、T/D 組、D/P 組、D/K 組及DMEM 組SDH 活性值分別為18.2 ± 3.7、12.3 ± 3.6、10.2 ± 2.4、7.3 ± 2.1 及5.7 ± 1.5。對照組與T/D 組比較差異無統計學意義(P gt; 0.05),與其他組比較,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。 結 論 海藻糖對低溫保存皮膚組織α-actinin 的保護作用在其抗凍機制中發揮了重要作用。