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      華西醫學期刊出版社
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      找到 作者 包含"周月" 2條結果
      • 靶向大鼠沉默信息調節因子1基因小干擾RNA慢病毒載體對大鼠視網膜神經節細胞中沉默信息調節因子1表達的影響

        目的 觀察靶向大鼠沉默信息調節因子1(Sirt1)基因的小干擾(si)RNA慢病毒載體對大鼠視網膜神經節細胞(RGC)中Sirt1表達的影響。 方法 設計4條靶向大鼠Sirt1基因的siRNA靶點序列,構建靶向大鼠Sirt1基因的siRNA慢病毒載體。采用菌落聚合酶鏈反應(PCR)和DNA測序鑒定陽性克隆。應用陽性重組質粒與包裝質粒共轉染293T細胞,進行慢病毒包裝及病毒滴度測定。將RGC分為空白對照組、轉染陰性對照病毒載體組(NC組)以及分別轉染4個帶有干擾序列的si-Sirt1-1組、si-Sirt1-2組、si-Sirt1-3組、si-Sirt1-4組。采用熒光定量PCR及蛋白免疫印跡法(Western blot)分別檢測各組RGC中Sirt1 mRNA、蛋白相對表達量。 結果 菌落PCR鑒定和DNA測序結果顯示,靶向大鼠Sirt1基因的siRNA慢病毒載體構建成功。在293T細胞中成功包裝后,其病毒滴度為8×108 TU/ml。熒光定量PCR和Western blot檢測結果顯示,與NC組比較,si-Sirt1-1組、si-Sirt1-2組、si-Sirt1-3組、si-Sirt1-4組RGC中Sirt1 mRNA、蛋白相對表達量均明顯下降,差異有統計學意義(F=27.682、1 185.206,P=0.000、0.000);其中,以si-Sirt1-2組Sirt1 mRNA、蛋白相對表達量下降幅度最為明顯。 結論 靶向大鼠Sirt1基因的siRNA慢病毒載體可降低大鼠RGC中sirt1 mRNA、蛋白表達。

        發表時間:2017-09-19 03:09 導出 下載 收藏 掃碼
      • 動脈栓塞聯合手術治療復雜化生性乳腺癌1例報道

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      小泉真希