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      華西醫學期刊出版社
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      找到 關鍵詞 包含"慢性腱病" 1條結果
      • BMP-2誘導人跟腱來源肌腱干細胞成軟骨分化的實驗研究

        目的探討BMP-2體外誘導人跟腱來源肌腱干細胞(human Achilles tendon-derived stem cells,hATDSCs)成軟骨分化的作用。 方法無菌條件下取急性跟腱斷裂患者自愿捐贈的跟腱組織,膠原酶消化獲得有核細胞;以500個/cm2細胞密度接種,細胞貼壁呈克隆樣生長,混合培養獲得原代hATDSCs;體外傳代培養至第3代,流式細胞儀檢測hATDSCs免疫表型;油紅O染色、茜素紅染色及番紅O/快綠染色分別鑒定hATDSCs成脂、成骨及成軟骨分化能力。取第3代細胞體外三維培養成微球后分為兩組,實驗組用重組人BMP-2(recombinant human BMP-2,rhBMP-2)干預,對照組不進行干預。3周后行微球大體觀察;組織學切片行HE染色、番紅O/快綠染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學染色觀察;實時熒光定量PCR檢測成軟骨特異性基因SOX9、Ⅱ型膠原和軟骨聚集蛋白多糖(Aggrecan)表達。 結果原代hATDSCs體外培養呈克隆樣集落生長;傳代后以紡錘形、成纖維樣細胞生長,形態均一。hATDSCs陽性表達MSCs特異性表面標志CD44、CD90、CD105,陰性表達CD34、 CD45和CD146。多向分化潛能鑒定示hATDSCs成脂誘導3周油紅O染色陽性,成骨誘導4周茜素紅染色陽性,成軟骨誘導3周番紅O/快綠染色陽性。rhBMP-2誘導hATDSCs 3周,實驗組微球形成,體積顯著大于對照組;HE染色、番紅O/快綠染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學染色均呈陽性,實時熒光定量PCR檢測示SOX9、Ⅱ型膠原和Aggrecan mRNA表達顯著高于對照組(P lt; 0.05)。 結論體外BMP-2可促進hATDSCs成軟骨分化和蛋白聚糖合成增加,為研究慢性腱病組織病理學變化提供細胞生物學依據。

        發表時間:2016-08-31 10:53 導出 下載 收藏 掃碼
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      小泉真希