目的探討體外采用嗅鞘細胞（olfactory ensheathing cells，OECs）無血清上清液誘導小鼠C17.2神經干細胞（neural stem cells，NSCs）向神經元定向分化及分化后的細胞活力。 方法采用新生3 d昆明小鼠嗅球，分離培養OECs，并制備無血清上清液。C17.2 NSCs置于含15%FBS的H-DMEM/F12培養基培養，傳至第3代，待細胞生長至80%融合時，分別加入OECs無血清上清液（實驗組）、H-DMEM/F12培養基（對照組）誘導培養；以未誘導的C17.2 NSCs作為空白對照組。倒置顯微鏡下觀察誘導后細胞生長情況，于誘導5 d后收集細胞行微管相關蛋白2（microtubule-associated protein 2，MAP-2）及β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulin-Ⅲ）免疫熒光染色鑒定，Western blot檢測細胞巢蛋白（Nestin）、β-tubulin-Ⅲ、MAP-2蛋白表達情況，檢測乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）漏出率并行MTT法檢測細胞活力。 結果實驗組：誘導后24 h細胞胞體開始收縮，3 d后分化的細胞明顯增多，突觸增長；對照組：誘導后24 h細胞形態無明顯改變，3 d后細胞胞體皺縮，細胞核質濃縮，并發生細胞裂解、破碎。誘導后5 d，免疫熒光染色示實驗組分化后細胞β-tubulin-Ⅲ和MAP-2表達均呈陽性，對照組及空白對照組均無表達。Western blot檢測顯示實驗組中NSCs標志物Nestin蛋白表達明顯減少，神經元標志物β-tubulin-Ⅲ和MAP-2 表達增加，與對照組及空白對照組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。實驗組LDH漏出率為130.60%±6.86%，顯著低于對照組的178.20%±5.44%；細胞活力為62.20%±3.82%，顯著高于對照組的18.00%±3.83%；比較差異有統計學意義（P＜0.05）；但均低于空白對照組的100%（P＜0.05）。 結論含有OECs分泌蛋白的OECs無血清上清液不僅能誘導NSCs向神經元分化，還能維持分化后細胞活力。