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      華西醫學期刊出版社
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      找到 作者 包含"焦海斌" 1條結果
      • miR-27a 過表達的血管內皮細胞來源外泌體改善股骨頭壞死實驗研究

        目的探究 miR-27a 過表達的人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)來源外泌體 exo(miR-27a)能否促進骨再生并改善糖皮質激素(glucocorticoids,GC)誘導的股骨頭壞死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)(GC-ONFH)。方法構建 exo(miR-27a),并通過透射電鏡、納米顆粒跟蹤分析、Western blot 和實時熒光定量 PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)進行鑒定。采用 qRT-PCR 評估 exo(miR-27a)遞送 miR-27a 至成骨細胞 MC3T3-E1 的效果,ALP 染色、茜素紅染色及 qRT-PCR 評估其對 MC3T3-E1 細胞成骨的影響。行雙熒光素酶報告基因檢測驗證 miR-27a 靶向 Dickkopf WNT 信號通路抑制劑 2(Dickkopf WNT signaling pathway inhibitor 2,DKK2)是否為潛在機制,并在 MC3T3-E1 細胞內通過 qRT-PCR、Western blot 及茜素紅染色進一步驗證該機制。最后,通過 SD 大鼠的 GC-ONFH 模型驗證 exo(miR-27a)對 ONFH 的保護作用。結果透射電鏡、納米顆粒跟蹤分析、Western blot 和 qRT-PCR 檢測示 exo(miR-27a)構建成功。exo(miR-27a)可將 miR-27a 有效遞送至 MC3T3-E1 細胞并提高其成骨能力。雙熒光素酶報告基因檢測示 miR-27a 通過直接靶向 DDK2 促進成骨。動物實驗 Micro-CT 及 HE 染色結果顯示,尾靜脈注射 exo(miR-27a)改善了 SD 大鼠 GC-ONFH 模型的骨壞死情況。結論exo(miR-27a)可以促進骨再生,并在一定程度上改善 GC-ONFH。

        發表時間:2021-03-26 07:36 導出 下載 收藏 掃碼
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      小泉真希