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      華西醫學期刊出版社
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      找到 關鍵詞 包含"Linamarase" 1條結果
      • linamarase穩定轉染肝癌細胞系的建立及研究

        目的構建含木薯linamarase (lis)基因的穩定轉染肝癌細胞系,并對其生物學特性進行研究。方法 應用PCR法從木薯的DNA中擴增出lis基因,將其克隆至pcDNA3.1(+)質粒中,構建重組質粒pcDNA3.1/lis。 通過脂質體法將其轉染人肝癌細胞系HepG2,進行G418篩選,獲得穩定轉染的肝癌細胞系HepG2/lis,通過免疫熒光染色、RT-PCR和Western blot法鑒定lis在細胞中的表達; 采用Lambert法對細胞內lis酶的活性進行分析; 采用MTT法觀察穩定轉染細胞系生長曲線,流式細胞儀分析細胞周期,裸鼠成瘤實驗分析其體內成瘤特性。結果 lis基因能穩定整合于真核細胞中,并包裝出具備β-葡萄糖苷酶活性的蛋白。lis在細胞中的穩定表達對細胞形態、生長特性、細胞周期、體內成瘤性等生物學特征并無明顯影響。 結論成功構建含lis基因的穩定轉染肝癌細胞系,為將lis自殺基因系統應用于肝癌的治療提供了實驗基礎。

        發表時間:2016-09-08 10:41 導出 下載 收藏 掃碼
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      小泉真希