目的觀察NLRP3炎癥小體拮抗劑MCC950干預對哮喘小鼠氣道黏蛋白Muc5ac表達水平的影響，探討NLRP3炎癥小體在哮喘氣道黏液高分泌中的作用及其機制。方法 無特定病原體級的6～8周齡的雌性BALB/c小鼠50只，隨機分為正常對照組（NS組）、哮喘組（AS組）、MCC950低劑量干預組（ML組）、MCC950高劑量干預組（MH組）及地塞米松組（Dex組），每組10只。各組小鼠支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）分別行總細胞計數、瑞士–吉姆薩染色行白細胞分類計數、酶聯免疫吸附試驗檢測白細胞介素（interleukin，IL）-18、IL-1β濃度；各組小鼠肺組織病理石蠟切片分別行伊紅染色、阿爾新藍–碘酸雪夫染色圖像分析，免疫組織化學及實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測肺組織Muc5ac、NLRP3及Caspase-1蛋白表達水平及相對mRNA表達量。結果 與NS組比較，AS組小鼠BALF細胞總數、嗜酸粒細胞百分比、IL-18及IL-1β濃度升高（P<0.05），肺組織氣道周圍炎癥細胞浸潤評分、氣道黏液物質陽性相對著色面積增加（P<0.05），肺組織Muc5ac、NLRP3及Caspase-1蛋白表達水平及相對mRNA表達量升高（P<0.05）；與AS組比較，MCC950干預組小鼠上述指標均減低（P<0.05）；與Dex組比較，MCC950干預組小鼠上述指標均升高（P<0.05）；ML組與MH組比較，上述指標差異無統計學意義。 結論MCC950可能通過抑制NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β表達，下調氣道黏蛋白Muc5ac表達，減輕氣道黏液高分泌。
目的探討NOD樣受體蛋白-3（NOD-like receptor protein 3，NLRP-3）炎癥小體抑制劑MCC950抑制人食管上皮細胞（human esophageal epithelial cells，HEECs）氧化應激、炎癥和焦亡的作用及相關機制。方法HEECs細胞經傳代培養，分為空白對照組、酸刺激組（使用pH=4酸性培養基每日刺激3次，每次15 min，培養48 h）、膽鹽刺激組（加入400 μmol/L膽鹽混合物，每日刺激3次，每次15 min，培養48 h）、脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）組（加入10 μL 100 ng/mL濃度的LPS孵育刺激48 h）、MCC950組（加入10 μL 7.5 ng/mL濃度的MCC950孵育4 h后，加入酸、膽鹽酸及LPS刺激HEECs細胞并孵育48 h）以及抗氧化劑N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine，NAC）組（加入1 mmol/L NAC并孵育4 h后，加入酸、膽鹽及LPS刺激HEECs細胞并孵育48 h），每組3個培養皿。采用實時定量逆轉錄-聚合酶鏈反應（reversetranscription-polymerase chain reaction，RT-PCR）和蛋白質印跡（Western blotting）實驗分別檢測氧化應激指標Nox-4（NADPH oxidase 4）、抗氧化蛋白指標 ［抗氧化蛋白核因子E2相關因子2（nuclearfactor erythroidderived 2-like 2，Nrf-2）和超血紅素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）］、NLRP-3信號通路 ［NLRP-3/半胱天冬酶（caspase）-1/白細胞介素（intereukin，IL）-1β/IL-18］ 及細胞焦亡通路 ［caspase-4/caspase-5/GSDMD］ 指標的mRNA和蛋白表達水平；通過Hoechst33342染色觀察細胞凋亡情況。結果MCC950干預（0.023）以及NAC干預（0.031）有效抑制酸（0.042）、膽鹽（0.047）和LPS（0.054）誘導的HEECs凋亡。RT-PCR結果顯示，MCC950干預以及NAC干預顯著抑制酸（2.40）、膽鹽（3.07）和LPS（3.52）誘導的HEECs細胞中Nox-4 mRNA（MCC950：1.68；NAC：1.62）的高表達，并顯著上調抗氧化蛋白Nrf-2（MCC950：0.72；NAC：0.57）和HO-1（MCC950：0.74；NAC：0.57）的mRNA表達水平。MCC950干預以及抗氧化劑NAC干預有效地抑制酸刺激、膽鹽刺激和LPS誘導的HEECs細胞中NLRP-3（MCC950：1.58；NAC：1.47）、ASC（MCC950：1.56；NAC：1.93）、caspase-1（MCC950：1.64；NAC：1.96）、IL-1β（MCC950：1.66；NAC：1.82）、IL-18（MCC950：1.58；NAC：1.84）的mRNA表達水平。MCC950干預以及NAC干預有效地抑制酸刺激、膽鹽刺激和LPS誘導的HEECs細胞中caspase-4（MCC950：1.51；NAC：1.61）、caspase-5（MCC950：1.38；NAC：1.64）和GSDMD（MCC950：1.41；NAC：1.54）的mRNA表達水平。蛋白電泳結果類似。結論酸、膽鹽及LPS均可誘導HEECs過量表達氧化應激指標，下調抗氧化蛋白表達，進而活化NLRP-3炎癥小體信號通路及細胞焦亡通路，促進細胞的炎癥損傷，而MCC950對其發生具有保護作用。