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      華西醫學期刊出版社
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      找到 作者 包含"何珍" 1條結果
      • 組織蛋白酶L抑制劑經線粒體途徑抑制氧化應激誘導的視網膜色素上皮細胞凋亡

        目的觀察組織蛋白酶(CTS)L抑制劑對視網膜色素上皮(RPE)細胞凋亡的作用及其對線粒體氧化應激的影響。方法體外培養的人RPE細胞分為正常組、過氧化氫(H2O2)組、H2O2+CTSL抑制劑組。H2O2組、H2O2+CTSL抑制劑組置于含400 μmol/L H2O2的培養基孵育24 h;H2O2+CTSL抑制劑組同時加入10 μmol/l CTSL抑制劑。正常組為常規培養細胞。建模后24 h進行后續實驗。流式細胞儀檢測細胞凋亡率;細胞免疫熒光染色、蛋白質免疫印跡法、實時定量聚合酶鏈反應檢測細胞中CTSL表達水平;MitoSOX熒光探針檢測細胞中線粒體超氧化物表達水平;MitoTracker染色觀察線粒體形態,定量分析線粒體平均面積、形狀因子、分支節點。兩組間比較采用雙尾Student t檢驗;多組間比較采用單因素方差分析。結果與正常組比較,H2O2組細胞凋亡率明顯增加,差異有統計學意義(t=3.307,P=0.029 7);細胞中CTSL表達水平升高(t=19.950、6.916、14.220,P<0.05)。與H2O2組比較,H2O2+CTSL抑制劑組CTSL表達水平、細胞凋亡率、細胞線粒體超氧化物水平顯著降低,差異有統計學意義(t=11.940、4.718、16.680,P<0.05)。H2O2+CTSL抑制劑組細胞線粒體呈細長橢圓形或桿狀;H2O2組細胞線粒體失去其連續輪廓與完整形態。4組細胞線粒體評價面積、形狀因子、分支節點比較,差異有統計學意義(F=251.700、34.010、60.500,P<0.000 1)。結論H2O2顯著誘導RPE細胞的凋亡、CTSL表達升高;CTSL抑制劑可抑制H2O2誘導的RPE細胞凋亡,降低線粒體超氧化物水平,有效恢復線粒體形態。

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      小泉真希