目的 探討脊椎蛋白2（R-spondin 2，Rspo2）對BMSCs成骨分化及卵巢去勢（ovariectomy，OVX）小鼠骨密度和骨礦含量的影響。方法 取7只4周齡雌性C57BL/6小鼠長骨骨髓，采用全骨髓培養法分離培養BMSCs并傳代，經流式細胞儀鑒定細胞表型后，取第3代細胞與10、20、40、80和100 nmol/L Rspo2共培養，采用細胞計數試劑盒8（cell counting kit 8，CCK-8）檢測細胞增殖，評價Rspo2對BMSCs活性影響并篩選不影響細胞活性的Rspo2干預濃度；與不同篩選濃度Rspo2培養后更換為成骨誘導培養基誘導培養，行ALP及實時熒光定量PCR（real time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）檢測RUNX 家族轉錄因子2（RUNX family transcription factor 2，Runx2）、Ⅰ型膠原（collagen type Ⅰ alpha 1，Col1）、骨鈣素（osteocalcin，OCN）基因表達，評價Rspo2對BMSCs成骨能力的影響；以上檢測均以正常培養BMSCs作為對照。另取18只10周齡雌性C57BL/6小鼠，隨機分為假手術組、OVX 組和OVX+Rspo2組，每組6只。假手術組僅行雙側背部切開縫合，其余兩組通過雙側OVX建立骨質疏松模型；術后OVX+Rspo2組每周腹腔注射Rspo2（1 mg/kg），其余兩組接受相同劑量生理鹽水。干預12周后，3組稱重小鼠體質量及子宮質量，評估OVX模型制備是否成功；取脛骨行HE染色觀察骨量變化、免疫組織化學染色觀察骨組織中Runx2蛋白表達水平；ELISA法檢測血清中骨代謝標記物 ［ALP、OCN、Ⅰ型前膠原氨基端肽（type Ⅰ procollagen amino-terminal peptide，PINP）］ 和骨吸收標記物 ［β膠原降解產物（β-isomerized C-telopeptide，β-CTX）］ 表達水平；Micro-CT檢測脛骨微結構變化，并對骨小梁厚度（trabeculae thickness，Tb.Th）、骨小梁數量（trabeculae number，Tb.N）、骨小梁分離度（trabeculae separation，Tb.Sp）和骨體積分數（bone volume fraction，BV/TV）進行三維組織形態計量分析。結果 CCK-8檢測示80 nmol/L以下濃度的Rspo2不會產生細胞毒性（P>0.05），且20 nmol/L Rspo2組細胞活力明顯高于對照組（P<0.05）。基于上述結果，選擇10、20和40 nmol/L Rspo2進行后續實驗。ALP染色示，各濃度Rspo2組陽性細胞面積明顯大于對照組，其中20 nmol/L Rspo2組最高，組間差異均有統計學意義（P<0.05）；RT-qPCR檢測成骨相關基因Runx2、Col1和OCN mRNA表達水平均較對照組提高，除40 nmol/L Rspo2組Runx2外，各組相關指標與對照組比較差異均有統計學意義（P<0.05）。動物實驗中各組小鼠術后均存活至實驗完成，且干預12周后小鼠體質量及子宮質量結果示OVX模型制備成功。組織學及免疫組織化學染色示，OVX組小鼠骨小梁疏松程度、連接性以及Runx2表達均低于假手術組，而OVX+Rspo2組經Rspo2處理后均較OVX組逆轉，差異有統計學意義（P<0.05）。ELISA檢測示OVX組小鼠血清中骨代謝標記物與假手術組相比，ALP表達升高、PINP表達下降（P<0.05）；Rspo2干預后，PINP表達逆轉顯著增高，與假手術組及OVX組差異均有統計學意義（P<0.05）。OXV組骨吸收標記物β-CTX高于假手術組（P<0.05），OVX+Rspo2組較OVX組明顯下降（P<0.05）。Micro-CT 檢測示，與假手術組相比，OVX組Tb.Th、Tb.N和BV/TV降低，而Tb.Sp增高（P<0.05）；經Rspo2干預后，除Tb.Th外OVX+Rspo2組上述指標均得到改善（P<0.05）。結論 Rspo2能夠促進BMSCs向成骨細胞分化，改善小鼠由于雌激素缺乏導致的骨質疏松，促進骨形成。