目的基于低溫沉積3D打印技術構建新型組織工程半月板支架，評價該支架理化性質及生物相容性。方法 取新鮮豬膝關節半月板，采用改良物理化學聯合方法脫細胞處理，獲得脫細胞半月板基質勻漿；經大體觀察、HE及DAPI染色觀察脫細胞效果，甲苯胺藍、番紅O及天狼猩紅染色評估黏多糖和膠原保留情況。然后制備脫細胞半月板基質生物墨水，通過低溫沉積3D打印技術制備新型組織工程半月板支架。掃描電鏡觀察微觀結構；與脂肪來源干細胞共培養后，采用細胞計數試劑盒8（cell counting kit 8，CCK-8）檢測支架細胞相容性，死/活細胞染色和細胞骨架染色觀察細胞活性和形態；植入大鼠皮下后組織學染色評估支架炎癥細胞浸潤與降解情況。結果 脫細胞處理后半月板基質勻漿呈透明凝膠狀，DAPI和組織學染色示免疫原性的核酸去除，同時黏多糖及膠原成分保留。采用低溫沉積3D打印技術成功構建新型組織工程半月板支架，掃描電鏡示支架呈分級大孔-微孔的微觀結構；CCK-8檢測示支架具有良好細胞相容性；死/活細胞染色示支架可有效維持細胞活性（>90%）；細胞骨架染色示支架有利于細胞黏附和鋪展；支架植入大鼠皮下1周后有輕度炎癥反應，3周后未見明顯炎癥反應，并可見支架逐步降解。結論基于低溫沉積3D打印技術構建的新型組織工程半月板支架具有分級大孔-微孔的微觀結構和良好細胞相容性，有利于細胞黏附和生長，為下一步體內研究奠定基礎。